Bakterioskopi er en diagnostisk teknik, der gør det muligt hurtigt og enkelt at identificere forekomsten af infektioner, fordi det ved hjælp af specifikke farvningsteknikker er muligt at visualisere de bakterielle strukturer i mikroskopet.
Denne test kan udføres med ethvert biologisk materiale, og lægen skal angive det materiale, der skal indsamles og analyseres, og resultatet indikerer, om forekomsten eller fraværet af bakterier samt deres mængde og egenskaber er blevet verificeret.
Hvad er det for
Bakterioskopi er en diagnostisk test, der kan gøres med ethvert biologisk materiale og kan bruges til hurtigt at identificere bakterielle infektioner:
- Seksuelt overførte sygdomme som gonoré og klamydia, for eksempel anvendes penile eller vaginale sekretioner til dette formål. Indsamlingen sker ved brug af en steril vatpind, og det er kontraindiceret at udføre genitalregionens hygiejne 2 timer før undersøgelsen og heller ikke at have sex i de 24 timer før indsamlingen;
- Tonsillitis, fordi gennem indsamling af halssekretioner er det muligt at identificere gram-positive bakterier med ansvar for inflammation i amygdala med tilstedeværelse af streptokokbakterier;
- Infektioner i urinsystemet, som gøres ved at analysere den første urinstrøm;
- Tuberkulose, hvor sputumet analyseres
- Infektioner i kirurgiske sår, da det er almindeligt, at infektioner opstår efter operationer på grund af formindskelsen af personens immunsystem. Således kan indsamling af sårsekretion med en steril vatpind indikeres for at verificere den mulige tilstedeværelse af bakterier i stedet;
- Hud- eller sømskader, der består af indsamling af en overfladisk prøve, ikke at bruge cremer og emaljer mindst 5 dage før undersøgelsen. Selvom bakterioskopi kan udføres, observeres sædvanligvis svampe, når man f.eks. Undersøger negleprøven.
Desuden kan bakterioskopi anvendes til at hjælpe med diagnosticering af bakteriel meningitis, respiratoriske og gastrointestinale sygdomme og kan udføres af biopsi eller analmateriale.
Således er bakterioskopi en laboratorieteknik, der kan anvendes i klinisk praksis til at diagnosticere sygdomme forårsaget af bakterier, hvilket angiver egenskaberne af sygdomsfremkaldende middel og således tillader lægen at starte behandlingen, selv før de bliver identificeret i laboratoriet, som kan tage ca. 1 uge.
Hvordan er det gjort?
Bakterioskopiundersøgelsen udføres i laboratoriet, og materialet opsamlet fra patienten analyseres i mikroskopet for at undersøge fravær eller tilstedeværelse af bakterier ud over dets egenskaber.
Forberedelsen til at tage eksamen afhænger af det materiale, der skal indsamles og analyseres. I tilfælde af vaginalt materiale anbefales det ikke for kvinden at hygiejne 2 timer før undersøgelsen og ikke have samleje i de sidste 24 timer, mens det i tilfælde af indsamling af negle eller hudmateriale f.eks. Anbefales at ikke passere emalje, cremer eller stoffer på huden forud for undersøgelsen.
I tilfælde af en prøve af vaginal sekretion, for eksempel, blev vatpinden, der blev anvendt til at gøre samlingen, passeret i cirkulære bevægelser på et dias, som skal identificeres med patientens initialer og derefter farves med farvningen af Gram. I tilfælde af en sputumprøve, som for eksempel materialet er opsamlet hovedsageligt for at verificere tilstedeværelsen af den bakterie, der er ansvarlig for tuberkulose, er farvningen anvendt i bakterioskopi den hos Ziehl-neelsen, som er mere specifik for denne type mikroorganisme.
Normalt, når tilstedeværelsen af bakterier er verificeret, udfører laboratoriet identifikationen af mikroorganismen og antibiogrammet, hvilket giver et mere komplet resultat.
Hvordan fremstilles Gram stain?
Farvning af gram er en simpel og hurtig farvningsteknik, der gør det muligt at differentiere bakterier i overensstemmelse med deres egenskaber, hvilket muliggør differentiering af bakterier til positiv eller negativ i henhold til deres farve, så deres visualisering under mikroskopet.
Denne farvningsmetode anvender to hovedfarvestoffer, en blå og en lyserød, som kan plette bakterierne eller ej. Bakterier farvet i blå siges at være gram-positive, mens de i pink kaldes gram-negative. Fra denne klassificering er det muligt, at lægen starter forebyggende behandling, selv før identifikationen af mikroorganismen.
Forstå, hvordan Gram plet er lavet
Bakteriel identifikation ved hjælp af gramfarvning er hurtig, praktisk og billig at gøre og er afgørende for læger, da specifikke karakteristika ved disse grupper af bakterier er kendt, og lægen kan angive en forebyggende behandling, der kun er baseret på farvning af gram.
Denne farve har som princip forskellen mellem bakterier i overensstemmelse med cellevæggenes egenskaber. Gram-positive bakterier har mere end en tyk mur af peptidoglycan, der er i stand til at beholde den første farvestof, mens gramnegative bakterier har en tyndere væg og let kan misfarves, når de udsættes for alkohol.
Gramfarvning udføres i 5 hovedtrin, men protokollen kan variere alt efter laboratoriet:
- Dæk bladet med violet krystalfarvestof og lad det fungere i ca. 1 minut;
- Vask bladet med en løbestrøm og dækk bladet med lugol, der har til formål at fastsætte det blå farvestof, og lad det virke i 1 minut. Begge typer bakterier kan absorbere komplekset dannet af farvestof og lugol, bliver blå;
- Vask derefter bladet med rindende vand og påfør 95% alkohol, lad det virke i 30 sekunder. Alkohol er ansvarlig for opløsning af lipidmembranen, som danner de gramnegative bakterier og derved fjerner komplekset dannet mellem farvestoffet og lugolen, misfarvning af disse bakterier. I tilfælde af gram-positive bakterier er alkohol imidlertid udarmet af cellevæggen af gram-positive bakterier, hvilket forårsager sammentrækning af porerne og gør dem uigennemtrængelige;
- Skyl derefter under rindende vand og dækk bladet med det andet farvestof, fuchsin eller safranin og lad det fungere i 30 sekunder;
- Bladet skal derefter skylles med ledningsvand og får lov til at tørre ved stuetemperatur.
Når bladet er tørt, er det muligt at placere en dråbe nedsænkningsolie og observere bladet i mikroskopet med et 100x objektiv. Det er muligt at verificere tilstedeværelsen eller tilstedeværelsen af bakterier såvel som tilstedeværelsen af gær og epithelceller.
Hvad betyder resultatet?
Målet med bakterioskopi resultatet er at indikere, om der er tilstedeværelse eller fravær af mikroorganismer, egenskaber og kvantitet udover det materiale, der blev analyseret.
Resultatet er negativt, når ingen mikroorganismer observeres og positive, når mikroorganismer visualiseres. Resultatet angives normalt i krydsninger (+), hvor 1 + indikerer at 1 til 10 bakterier blev visualiseret i 100 felter og kunne være indicative for en initial infektion, for eksempel, og 6 + repræsenterer tilstedeværelsen af mere end 1000 bakterier pr. observeret felt, der repræsenterer en mere kronisk infektion eller bakteriel resistens, for eksempel, hvilket indikerer, at behandlingen ikke er effektiv.
Desuden er de farvningsoplysninger, der er anvendt i rapporten, kendt, hvilket for eksempel kan være Gram eller Ziehl-neelsen, foruden mikroorganismens egenskaber, som en form og et arrangement, uanset om det er i klynger eller i kæder.
Normalt, når resultatet er positivt, identificerer laboratoriet mikroorganismen og antibiogrammet, hvilket angiver hvilket antibiotikum der er mest anbefalet til at behandle infektion med en bestemt bakterie.
